CN氰基色譜柱的鍵合官能團氨丙基要比C18,C8柱的鍵合官能團C18,C8容易水解,所以首先要做好其使用壽命稍遜的心理準備,特別是當你的使用條件是反相條件下時(shí)。
反相條件使用時(shí),要特別注意控制PH值范圍,PH值越低越有發(fā)生水解的危險,流動(dòng)相中水的比例越高當然也越有發(fā)生水解的危險。所以,在使用后以及準備長(cháng)時(shí)間放置時(shí),必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機溶劑中是必需的。
當使用CN氰基色譜柱進(jìn)行酸性物質(zhì)如果汁中糖份的分析時(shí),酸性物質(zhì)的存在意味著(zhù)質(zhì)子的存在,可能會(huì )使略帶負電荷的氨基官能團質(zhì)子化,使用一段時(shí)間后對于某類(lèi)的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現為柱效下降。這時(shí),專(zhuān)家所給的建議是:用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液沖洗該柱(沖洗后當然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨),之后再進(jìn)行分析這類(lèi)酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1%。
CN氰基色譜柱的清洗
簡(jiǎn)單說(shuō)起來(lái),正相條件下使用的氨基柱參照硅膠柱的清洗方法;反相條件下使用的CN氰基色譜柱參照C18的清洗方法。
(1)平時(shí)在正相條件下使用:
首先用50倍柱體積的異丙醇清洗,因異丙醇粘度較大需適當放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之后,用異丙醇過(guò)渡回到平常使用的正相流動(dòng)相,即可。
(2)平時(shí)在反相條件下使用:
緩沖鹽應及時(shí)沖洗,不能直接用純甲醇沖洗緩沖鹽等,屬常識就不作特別交待。
用50倍純甲醇沖洗;之后,用異丙醇過(guò)渡后,用二氯甲烷沖洗色譜柱;之后,再用異丙醇過(guò)渡回來(lái)到甲醇條件下。
這些清洗方法,主要是針對當樣品中有雜質(zhì)逐步吸附累積到填料上時(shí)的處理方法,色譜柱表現行為為諸如柱壓增高柱效降低等。