DikmaPureHPLC離子對試劑的選擇

DikmaPureHPLC離子對試劑的種類(lèi)和濃度對分離效果都有較大和影響。DikmaPureHPLC離子對試劑種類(lèi)的選擇依賴(lài)于被分離樣品的性質(zhì)。被分離溶質(zhì)是強酸或強堿,離子對試劑可以是強酸或強堿,弱堿或強酸,弱酸,如被分離的溶質(zhì)是弱酸或弱堿,則選用的DikmaPureHPLC離子對試劑必須是強堿或強酸。對于溶質(zhì)結構性質(zhì)相差較大的混合樣品,離子對試劑種類(lèi)的選擇并沒(méi)有 特殊要求.離子對試劑疏水性的差別可以通過(guò)調節離子對試劑濃度和有機溶劑濃度獲得滿(mǎn)意的分離效果.

 

DikmaPureHPLC離子對試劑的使用  

“DikmaPureHPLC離子對試劑不一定是表面活性劑，如己烷和庚烷磺酸鈉，又如三乙胺活四丁基溴化胺，不具表面活性作用。所以用己烷和庚烷鹽就沒(méi)有泡末，用四丁基溴化胺也不產(chǎn)生氣泡。十二烷基磺酸鈉（或硫酸鈉），或者十六烷基溴化鈉（CTAB,一種做陰離子用的陽(yáng)性表面活性劑），在濃度高的時(shí)候容易產(chǎn)上泡末。做HPLC時(shí)流動(dòng)相里加的SDS或CTAB濃度一般不會(huì )太高，一般在0.1%以下，而且流動(dòng)相里有甲醇等有機溶劑，高濃度的有機溶劑有破乳的作用，因此，混合后的流動(dòng)相泡末應該不會(huì )很多。另外，做電泳加入的SDS量很大的比如做蛋白質(zhì)SDS膠，或者毛細管電泳里的MECC，SDS濃度很高，而且沒(méi)有或者有很少比例的有機改性劑，當然會(huì )有氣泡，跟HPLC不*相同。”

 

使用DikmaPureHPLC離子對試劑時(shí)，調節保留時(shí)間的方式與普通反相不同，變化有機相比例沒(méi)有改變PH值來(lái)得有效。 

“當流動(dòng)相PH值較高時(shí)，樣品以中性形式存在，那么正電荷較少，相應的保留較弱；當流動(dòng)相PH值較低時(shí)，樣品便以質(zhì)子堿H+形式的離子狀態(tài)存在，那么正電荷與固定相上帶負電荷的-SO3強烈吸附，相應的保留會(huì )非常強。”  

“再說(shuō)明一下B物質(zhì)的pKa，其值為10.5，在pH為4.5、3.8時(shí)都以離子態(tài)存在，這點(diǎn)沒(méi)錯，雖然都是離子態(tài)，都是99%以上，但從量上說(shuō)還是有點(diǎn)不一樣的。任何物質(zhì)以離子態(tài)存在時(shí)都有一個(gè)平衡的狀態(tài)：B＋（H＋）＝＝（BH＋），這里存在著(zhù)一個(gè)平衡常數K（或者說(shuō)離解常數），于是pH不同時(shí)，H＋不同，對應的B、BH＋也不同。所以才會(huì )出現pH不同，保留值會(huì )不同。