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紅2G是一種工業(yè)合成色素,屬于偶氮類(lèi)染料,又名酸性紅1或食品紅10。由于其價(jià)格低廉,著(zhù)色力強,常被不法商販用于食品加工。人食用紅2G后可能會(huì )引起食物中毒,長(cháng)期食用甚至會(huì )致癌。
2007年歐盟27國宣布禁止在食品中使用紅2G,隨后中國、美國、加拿大、日本等國家也明確禁止食品中使用紅2G。目前國內還沒(méi)有出臺相關(guān)檢測標準。
方法優(yōu)勢:
迪馬科技開(kāi)發(fā)的《食品中紅2G(酸性紅1)的檢測》方案,具有以下優(yōu)勢:
(1) 采用乙醇、乙腈和水提取,ProElut PWA-2固相萃取柱凈化,HPLC-PDA檢測;
(2) 具有提取方法簡(jiǎn)單、回收率高、凈化效果優(yōu)異、方法穩定性好等優(yōu)點(diǎn);
(3) 方法定量限0.1 mg/kg。
以下為詳細解決方案,敬請參考!
食品中紅2G(酸性紅1)的檢測——HPLC-SPE法
1、適用范圍
本方案適用于鹵雞腿、火腿(肉腸)、棗、酸奶及紅酒中紅2G的檢測。方法定量限是0.1 mg/kg。
2、標準品配置
標準儲備液:準確稱(chēng)取酸性紅1標準品,用10%甲醇水溶液分別配制成1000 μg/mL和10 μg/mL的標準儲備液。
3、提取
3.1 鹵雞腿、火腿(肉腸)
(1) 取1.0 g樣品,加入1 g C18粉末,加入20 mL提取液A*,振蕩2 min,60 ℃水浴超聲提取10 min,6000 rpm下離心2 min,收集上清液;
(2) 向下層殘渣中加入10 mL提取液A*,振蕩2 min,60 ℃水浴超聲提取15 min,6000 rpm下離心2 min;
(3) 再向下層殘留物,加入10 mL提取液A*按(2)重復提取一次,合并三次上清液,6000 rpm下離心2 min,收集上清液;
(4) 在35 ℃水浴條件下,減壓蒸至約12 mL,再加入3 mL甲酸混勻,待凈化。
3.2 棗
(1) 1.0 g樣品,加入20 mL提取液A*,振蕩2 min,60 ℃水浴超聲提取10 min,6000 rpm下離心2 min,收集上清液;
(2) 取下層殘留物,加入10 mL提取液A*,振蕩2 min,60 ℃水浴超聲提取15 min,6000 rpm下離心2 min;
(3) 再向下層殘留物,加入10 mL提取液A*按(2)重復提取一次,合并三次上清液,6000 rpm下離心2 min,收集上清液;
(4) 在35 ℃水浴條件下,減壓蒸至約12 mL,再加入3 mL甲酸混勻,待凈化。
3.3 酸奶
(1) 1.0 g樣品,加入20 mL提取液A*,振蕩2 min,60 ℃水浴超聲提取10 min,6000 rpm下離心2 min,收集上清液;
(2) 在35 ℃水浴條件下,減壓蒸至約7 mL,再加入1.5 mL甲酸混勻,待凈化。
3.4 紅酒
取1.0 mL樣品,加入0.3 mL甲酸混勻,待凈化。
*提取液A:取100 mL乙醇和50 mL乙腈,混勻,取140 mL乙醇:乙腈(2:1)混合溶液,加入60 mL水和2 mL氨水,混勻。
4、凈化——ProElut PWA-2 150 mg/6 mL(Cat.#65815)
(1) 活化:依次用5 mL甲醇、5 mL10%甲酸水活化,棄去流出液;
(2) 上樣:將待凈化液加入柱中,棄去流出液;
(3) 淋洗:依次加入5 mL 水、5 mL甲醇,棄去流出液;
(4) 洗脫:加入6 mL15%氨水甲醇溶液洗脫,收集流出液;
(5) 定容:將洗脫液在50 ℃下氮吹至約300 μL,用流動(dòng)相定容至1 mL,供HPLC分析。
5、色譜條件
色譜柱:Diamonsil C18(2), 250 × 4.6 mm, 5 μm(Cat.# 99603)
流 速:1.0 mL/min
進(jìn)樣量:20 μL
柱 溫:35 ℃
檢測器:PDA 534 nm
流動(dòng)相:A:0.02 mol/L 乙酸銨溶液 B:乙腈
梯度設置
時(shí)間(min) | 0 | 12 | 16 | 18 | 28 |
A(%) | 95 | 70 | 63 | 95 | 95 |
B(%) | 5 | 30 | 37 | 5 | 5 |
6、添加回收結果
食品中紅2G(酸性紅1)的檢測相關(guān)產(chǎn)品信息
貨號 | 名稱(chēng) | 規格 |
樣品前處理 | ||
65815 | 混合型弱陰離子交換反相柱 ProElut PWA-2 | 150 mg/6 mL, 30/pk |
63182 | C18填料粉末 | 100 g |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6 mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵,無(wú)油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30039 | 針頭式過(guò)濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | 針頭式過(guò)濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
色譜柱 | ||
99603 | 通用型反相液相色譜柱 Diamonsil C18(2) | 250 × 4.6 mm ID, 5 μm |
標準品 | ||
12-NG-BS135-1G | 紅2G [3734-67-6] | 1 g |
HPLC溶劑·緩沖鹽·離子對試劑 | ||
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50102 | 甲醇HPLC級 | 4 L |
50108 | 乙醇 HPLC級 | 4 L |
50144 | 甲酸HPLC級 | 50 mL |
50138 | 醋酸銨HPLC級 | 100 g |
通用色譜產(chǎn)品 | ||
52401B | 瓶架/藍色 | 50 孔 |
52401A | 瓶架/白色 | 50孔 |
1034 | 樣品瓶(棕色/螺紋) | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝) | 100/pk |
H80465 | HPLC 進(jìn)樣針 | 25 μL |
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