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HPLC/UHPLC兼容色譜柱常見(jiàn)故障判斷及排除方法

更新日期：2019-09-26 信息來(lái)源：本站瀏覽次數：2077

HPLC/UHPLC兼容色譜柱常見(jiàn)幾種故障判斷及排除方法

1.柱壓?jiǎn)?wèn)題柱壓?jiǎn)?wèn)題是使用色譜過(guò)程中需要密切注意的地方，柱壓的穩定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān)。

壓力過(guò)高：

這是液相在使用中常見(jiàn)的問(wèn)題，指的是壓力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此時(shí)，我們應該分段進(jìn)行檢查。

（1）先斷開(kāi)真空泵的入口處，此時(shí)，PEEK管里充滿(mǎn)液體，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果，液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過(guò)濾頭堵塞。

處理方法：

用30%的硝酸浸泡半個(gè)小時(shí)，在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下，溶劑過(guò)濾頭正常，再檢查；

（2）打開(kāi)Purge閥，使流動(dòng)相不經(jīng)過(guò)柱子，如果壓力沒(méi)有明顯下降，則是過(guò)濾白頭堵塞。

處理方法：

將過(guò)濾白頭取出，用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí)。如果壓力降至100PSI（6.7Bar）以下，過(guò)濾白頭正常，再檢查；

（3）把HPLC/UHPLC兼容色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。

處理方法：

如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強保留的物質(zhì)導致堵塞，則要用比現在流動(dòng)相更強的流動(dòng)相沖至壓力正常。

假如，按上面的方法長(cháng)時(shí)間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上，用流動(dòng)相沖洗柱子。這時(shí)，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但是，一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以，盡量少用。