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網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)支持 ◇ 免疫親和柱有著(zhù)怎樣的使用要點(diǎn)?
免疫親和柱有著(zhù)怎樣的使用要點(diǎn)?
  • 更新日期:2022-01-14     信息來(lái)源:本站      瀏覽次數:983
    •    免疫親和柱的原理:

        本實(shí)驗測定的基礎是抗原抗體間的特異性反應。單克隆抗體被偶聯(lián)在柱內凝膠上,樣品中的經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、稀釋?zhuān)蝗缓髮悠诽崛∫和ㄟ^(guò)鍵合有抗體的親和柱。
      此時(shí),鍵合在親和柱中的抗體上。之后用蒸餾水將親合柱上的雜質(zhì)除去。用甲醇洗脫親和柱,將從抗體上分離下來(lái)。將過(guò)濾的甲醇溶液注入熒光計或HPLC進(jìn)行測定。
       
        特點(diǎn):
        1、采用定向偶聯(lián)技術(shù),抗體載量大,有效柱容量高。所有親和柱產(chǎn)品柱容量均滿(mǎn)足國標對于商品化柱容量的要求;
       
        2、凝膠粒徑均勻,過(guò)柱自然流速即可,不需額外加壓;
       
        3、采用抗體定向偶聯(lián)技術(shù),樣本回收率高;
       
        4、操作簡(jiǎn)便,可洗脫后直接進(jìn)樣,無(wú)需氮吹。
       

      免疫親和柱

       

        免疫親和柱的使用要點(diǎn):
        1、上柱的樣品溶液應該保持酸堿中性、無(wú)懸浮物、甲醇濃度不宜過(guò)高;
       
        2、若樣品為復雜樣品,例如高蛋白、高油脂、酸性樣品,可以將提取液分兩次提取樣品,可以提高提取效果;
       
        3、樣品過(guò)柱及甲醇洗脫速度要慢且均勻,約每秒1-2滴;
       
        4、抗原抗體發(fā)生反應的最佳溫度是在25℃左右,實(shí)驗需要的環(huán)境溫度最好是室溫24℃-28℃,太高或太低的溫度都會(huì )對回收率有一定的影響。在使用前需要恢復至室溫再進(jìn)行實(shí)驗;
       
        5、不要在無(wú)水狀態(tài)下,瓊脂容易干燥萎縮,影響質(zhì)量;
       
        6、儲存條件為4℃-8℃。切記0℃以下的低溫,因為緩沖液凍結,會(huì )嚴重影響親和柱內的物理結構,對質(zhì)量影響很大;
       
        7、洗脫一般選擇試劑甲醇,為增強洗脫效果可加大甲醇體積;
       
        8、樣液免疫凈化后,洗脫液過(guò)0.45um或更小孔徑濾膜效果更好。

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