C18色譜柱選用的基本原則:
?。?)選用經(jīng)過(guò)烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現象。
?。?)選用含碳量高的柱子,增加保留值。
?。?)選用較短的柱子。
?。?)選用小顆粒度的填料。
?。?)對分子量大的組分選用大孔徑填料的柱子。
C18色譜柱在日常使用過(guò)程中應注意的事項:
?。?)柱子在裝卸、更換時(shí),動(dòng)作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動(dòng),以免柱床產(chǎn)生空隙。
?。?)如果儀器用來(lái)做常規分析,樣品種類(lèi)有限,但分析次數多,則不妨為每一類(lèi)常規分析配置1根專(zhuān)用柱,這樣有助于延長(cháng)柱子的壽命。
?。?)如使用柱溫控制裝置時(shí),應注意在通入流動(dòng)相后才能升溫。
?。?)流動(dòng)相使用前需進(jìn)行脫氣處理,以免降低柱效和影響檢測等。樣品溶液需經(jīng)適當的前處理及過(guò)濾,以減少柱污染和堵塞。
?。?)在更換流動(dòng)相種類(lèi)時(shí),應注意溶劑的互溶性,防止發(fā)生鹽析現象。
?。?)柱子的實(shí)際操作壓力應低于填裝時(shí)的較高壓力,在高壓力一半以下。
?。?)屬非極性鍵合相色譜柱,流動(dòng)相的pH值應嚴格控制在一定區間之間,以免損壞柱子。
?。?)在完成分離分析工作之后,不應立即停機,需及時(shí)對色譜分析系統進(jìn)行沖洗,以除去色譜柱內的雜質(zhì)。
?。?)如果流動(dòng)相中有鹽類(lèi),首先用水充分清洗。如果是胺類(lèi)添加到流動(dòng)相中,要用甲醇和磷酸溶液混合溶劑沖洗,不要只用水沖洗。
?。?0)C18一般用甲醇作為保存溶劑,以防柱子干裂而損壞。嚴禁水或緩沖溶液長(cháng)時(shí)間在色譜流路中保留。
?。?1)選用合適的C18保護柱,以保護分析柱免受雜質(zhì)顆粒及不可逆吸附的干擾物的影響。保護柱內裝填料顆粒度應與分析柱填料的顆粒度盡量一致。