1.8 μm UHPLC反相色譜柱中污染物的形成
更新日期:2014-09-28 信息來(lái)源:本站 瀏覽次數:2024
通常,樣品基體里總是含有一些對分析者來(lái)說(shuō)不感興趣的化合物。鹽類(lèi)、脂質(zhì)、含脂肪的化合物、腐殖酸、疏水性的蛋白質(zhì)和其他的一些生物化合物就是在使用中能夠接觸到液相色譜柱的可能物質(zhì)。這些物質(zhì)可能會(huì )比所需分析的物質(zhì)更強或更弱的保留能力。那些保留能力比較弱的化合物如鹽類(lèi),將以死體積被洗脫出來(lái)。這些不希望發(fā)生的干擾可以通過(guò)檢測器觀(guān)察到,它表現為一些色譜峰、斑點(diǎn)、基線(xiàn)干擾,甚至是一些倒峰。如果樣品基體組成在色譜柱中有強的保留性,且流動(dòng)相組成本身就不強到足以使其洗脫出來(lái),這些被吸附的、或是被吸收的化合物將會(huì )累積,通常是在經(jīng)過(guò)多次進(jìn)樣之后堵塞在色譜柱的柱頭。這種特征是在等度條件下觀(guān)察得到的。中等保留能力的樣品混合物可以被緩慢的洗脫出來(lái),其表現為寬峰、基線(xiàn)干擾或基線(xiàn)漂移。
有時(shí),這些吸附的樣品組成達到了比較高的濃度,它們便表現為一種新的固定相。被分析物可與這些雜質(zhì)作用并表現為新的分離機理。它可能會(huì )引起保留時(shí)間的變化和峰的拖尾。如果色譜柱受到了比較嚴重的污染,色譜柱的反壓力會(huì )達到一個(gè)無(wú)法承受的高度,這將會(huì )使泵超壓工作,在堵塞的位置引起柱的塌陷并產(chǎn)生中空。