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極性改性反相色譜柱的日常維護
  • 更新日期:2014-10-13     信息來(lái)源:本站      瀏覽次數:2003
    • 極性改性反相色譜柱的日常維護

      正確使用緩沖鹽
      緩沖鹽通常易溶于水,難溶于有機溶劑,因此緩沖鹽使用不當會(huì )使其析出,堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,使填料板結,柱壓上升;同時(shí)阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展,使色譜柱的保留能力下降,柱效降低。緩沖鹽析出后,去除非常困難,因此,正確的使用緩沖鹽對延長(cháng)色譜柱使用壽命非常重要。
      正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結為一句話(huà):使用前要過(guò)渡,使用后要沖洗。具體方法如下:     
      1. 等度條件:使用緩沖鹽前需用過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min流速沖洗30min,
      使用后去除緩沖鹽的另一個(gè)方法是用過(guò)渡流動(dòng)相以0.2ml/min流速沖洗
      色譜柱過(guò)夜。
      2. 梯度條件:用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前,用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min流速沖洗30min;分析完成后,再用該過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min沖洗色譜柱45min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設定應盡量平緩,以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出。
      注意:過(guò)渡流動(dòng)相是指有機相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同,區別只是過(guò)渡流動(dòng)相中不含緩沖鹽。
      3. 緩沖鹽析出的補救方法:
         1)方案1:用甲醇/水=20/80以1.0ml/min流速35℃條件下反向沖洗色譜柱120min;
         2)方案2:用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過(guò)夜。

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