Silica硅膠色譜柱的維護與使用

    為獲得最長(cháng)的柱壽命，應避免使用不互溶的或有害的流動(dòng)相。在選擇和配制流動(dòng)相時(shí)，應考慮下面幾點(diǎn)：

    1、決不要用不相溶的溶劑依次通過(guò)色譜柱。

    確保即將泵入柱中的溶劑及目前在柱中的溶劑*相溶，否則必須泵入一種或多種互溶的中間溶劑于柱中，以免產(chǎn)生高壓。

    2、在流動(dòng)相中只用純溶劑。

    制備流動(dòng)相時(shí)，必須用高純(HPLC級)溶劑。緩沖鹽及離子對試劑中存在的痕量污染物在其它應用中可能不會(huì )產(chǎn)生問(wèn)題，但若用于HPLC流動(dòng)相中，則會(huì )導致嚴重的結果。使用不純流動(dòng)相會(huì )產(chǎn)生基線(xiàn)漂移或出現污染峰，特別是采用梯度洗脫時(shí)。痕量雜質(zhì)也會(huì )吸附于柱頭上，導致分辨率下降及柱壽命縮短。所有溶劑使用前都必須過(guò)濾并脫氣。

    3、注意一旦加入有機溶劑時(shí)緩沖溶液可能出現沉淀。

    當在流動(dòng)相中使用緩沖液、離子對試劑或其它鹽時(shí)，應注意有機物含量增加時(shí)會(huì )出現沉淀。

    4、不要使用能與鍵臺相或硅膠發(fā)生化學(xué)反應的流動(dòng)相。

    大多數情況下，HPLC中使用的鍵合相相當穩定，一般而言，硅氧鍵將官能團鍵合至硅膠粒上，強酸條件下可能會(huì )出現硅氧鍵的水解，故流動(dòng)相的PH值應保持在2.0(注意：有些色譜柱耐受限可達PH1.0)以上。若必要，也可用到PH2以下，但柱壽命將會(huì )縮短.