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反相液相色譜柱分配色譜

更新日期：2015-07-28 信息來(lái)源：本站瀏覽次數：2245

反相液相色譜柱色譜法的基本原理

利用樣品混合物中各組分理、化性質(zhì)的差異，各組分程度不同的分配到互不相溶的兩相中。當兩相相對運動(dòng)時(shí)，各組分在兩相中反復多次重新分配，結果使混合物得到分離。

反相液相色譜柱分配色譜

原理:固定液機械的吸附在惰性載體上，樣品分子依據他們在流動(dòng)相和固定相間的溶解度不同，分別進(jìn)入兩相分配而實(shí)現分離。

固定相：將一種極性或非極性固定液吸附在惰性固相載體上。如全多孔微粒硅膠吸附劑。

根據極性不同分類(lèi)：正相分配色譜—固定相載體上涂布的是極性固定液；

流動(dòng)相是非極性溶劑；

可分立極性較強的水溶性樣品；

弱極性組分先洗脫出來(lái)。反相分配色譜—固定相載體上涂布的是非極性或弱極性固定液；

流動(dòng)相是極性溶劑；

強極性組分先洗脫出來(lái)。

液-液分配色譜固定相中的固定液體往往容易溶解到流動(dòng)相中去，所以重現性很差，且不能進(jìn)行梯度洗脫，已經(jīng)不大為人們所采用。

反相液相色譜柱的填料常是以硅膠為基質(zhì)，表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強，通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。

樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組份zui先被沖洗出，而極性弱的組份會(huì )在色譜柱上有更強的保留。

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