由于被分析樣品種類(lèi)繁多,加之樣品基質(zhì)復雜,色譜柱極易被污染,是導致柱壓升高、分離能力下降的原因之一,通常有下面兩種情況。
1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物,堵在柱頭篩板上,極易導致柱壓高;上樣前用針式濾器過(guò)濾將很好的解決這個(gè)問(wèn)題,一般有0.22和0.45um規格,根據您的需要選擇合適規格的。同時(shí)在柱前接上在線(xiàn)過(guò)濾器,可過(guò)濾流動(dòng)相攜帶的顆粒,泵、進(jìn)樣閥磨損流失的顆粒物。
2、吸附性強的小分子很難洗脫下來(lái),多次上樣后聚集在柱頭,可導致柱效差,柱壓高,尤其是食品、生物、環(huán)境樣品更容易損傷色譜柱,建議用SPE固相萃取去雜,并安裝保護柱。
反相液相色譜柱養成測柱效的習慣,正確評價(jià)色譜柱
每個(gè)廠(chǎng)家的色譜柱出廠(chǎng)報告中都會(huì )附有一份柱效報告譜圖,代表該色譜柱的性能,我們只要留意理論塔板數和拖尾因子即可。當拿到色譜柱后,建議先測柱效(可參照出廠(chǎng)柱效報告上的方法),保留譜圖,再做樣品。
當使用了一段時(shí)間后,或者實(shí)驗出現問(wèn)題時(shí),換一臺正常的液相儀測柱效,對比上述保留的新柱柱效報告來(lái)評價(jià)該色譜柱,這樣做可以排除液相儀、樣品等其它因素,正確的判斷色譜柱是否合格。
在修復損壞的色譜柱時(shí),柱效測試將是您判斷是否修復好的*指標,并且柱效測試流動(dòng)相很簡(jiǎn)單,能快速驗證。