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二甲基黃和二乙基黃,屬于工業(yè)染劑,主要用于石蠟、塑膠、印刷油墨、石油和肥皂等的著(zhù)色,具有致癌性。因其不屬于食品添加劑范疇,從未列入中國臺灣監控部門(mén)的常規檢查項目,被當地不法商人利用至今。目前,關(guān)于該類(lèi)物質(zhì)的測定方法幾乎沒(méi)有報道。
迪馬科技建立固相萃取-超液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)檢測腐乳中二甲基黃和二乙基黃,本方案具有
以乙腈為提取液,采用ProElut DYC固相萃取柱凈化樣品,通過(guò)UPLC- MS/MS檢測;
前處理步驟簡(jiǎn)單、凈化效果好、回收率高、基質(zhì)效應小優(yōu)點(diǎn);
保證實(shí)驗結果準確性、重現性。方法檢出限0.03 μg/kg,定量限為0.1 μg/kg;
適用于各省市出入境、質(zhì)檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機構、食品檢測機構等。
ProElut DMY 柱由2種吸附劑按照一定的比例分層填裝而成,采用不同作用機理去除雜質(zhì),同時(shí)對二甲基黃和二乙基黃沒(méi)有不可逆吸附,保證了樣品的凈化效果及回收率;本產(chǎn)品是商品化的成品柱,不用手工填裝,吸附劑穩定性好,不受外界環(huán)境因素影響,保證實(shí)驗結果的重現性和準確性;過(guò)柱過(guò)程操作步驟簡(jiǎn)單,節省時(shí)間,提高了工作效率
以下為詳細解決方案,敬請參考!
腐乳中二甲基黃和二乙基黃的測定
1、適用范圍
適用于腐乳中二甲基黃和二乙基黃的檢測,二甲基黃的方法檢出限是0.03 µg/kg,二乙基黃的方法檢出限是0.04 µg/kg,定量限是0.1 µg/kg。
2、提取
取1.0 g樣品,加1.0 g氯化鈉與5 mL乙腈,渦旋混勻,6000 rpm下離心2 min,精密量取2.5 mL上清液待凈化。
3、凈化——ProElut DMY 3 mL(Cat#:65914)
a活 化: | 3 mL乙腈活化; |
b上 樣: c淋 洗: | 加入待凈化液,棄去流出液; 加入3 mL乙腈,棄去流出液; |
d洗 脫: | 加入4 mL10%氨水甲醇,收集流出液; |
d重新溶解: | 將流出液在50 ℃下氮吹至干,用乙腈定容至1 mL,過(guò)0.22 µm微孔濾膜,供LC-MS分析。 |
4、分析條件
4.1 UPLC 條件:
色譜柱:Endeavorsil C18,100 × 2.1 mm,1.8 μm (Cat.# 87003)
流 速:0.2 mL/min
進(jìn)樣量:5 μL
柱 溫:35 ℃
流動(dòng)相: A:0.1%甲酸水 B:乙腈
梯度設置
時(shí)間/Min. | 0 | 5 | 5.5 | 10 |
A(%) | 20 | 10 | 20 | 20 |
B(%) | 80 | 90 | 80 | 80 |
4.2 質(zhì)譜條件:
電離模式:ESI | 掃描方式:正離子掃描 |
檢測方式:多反應監測 | 電噴霧電壓:5500 V |
霧化氣壓力:50 psi | 輔助氣壓力:50 psi |
氣簾氣壓力:20 psi | 離子源溫度:500 ℃ |
定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見(jiàn)下表
藥物名稱(chēng) | 定性離子對 | 定量離子對 | 碰撞氣能量/eV | 去簇電壓/ V |
(m/z) | (m/z) | |||
(母離子/子離子) | (母離子/子離子) | |||
二甲基黃 | 226.2/77.0 | 226.2/77.0 | 28 | 77 |
226.2/134.1 | 28 | |||
二乙基黃 | 254.2/120.2 | 254.2/120.2 | 34 | 73 |
254.2/148.1 | 26 | |||
254.2/134.1 | 33 |
5、添加回收結果
腐乳中二甲基黃和二乙基黃的LC-MS檢測添加回收結果
分析物 | 基質(zhì) | 添加水平(µg/kg) | 回收率(%) |
二甲基黃 | 黃色腐乳 | 1.0 | 95.4 |
二乙基黃 | 1.0 | 98.6 | |
二甲基黃 | 紅色腐乳 | 1.0 | 90.5 |
二乙基黃 | 1.0 | 92.3 |
二甲基黃標準多反應監測色譜圖
二乙基黃標準多反應監測色譜圖
添加水平為1.0 µg/kg黃色腐乳中二甲基黃和二乙基黃檢測的多反應監測色譜圖
黃色腐乳中二甲基黃二二乙基黃檢測(空白樣品)的多反應監測色譜圖
添加水平為1.0 µg/kg紅色腐乳中二甲基黃和二乙基黃檢測的多反應監測色譜圖
紅色腐乳中二甲基黃二二乙基黃檢測(空白樣品)的多反應監測色譜圖
腐乳中二甲基黃和二乙基黃的測定相關(guān)產(chǎn)品信息:
貨號 | 名稱(chēng) | 規格 |
樣品前處理 | ||
65914 | 用于腐乳中二甲基黃、二乙基黃檢測 ProElut DMY | 3 mL, 50/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵,無(wú)油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30039 | FitMax針頭式過(guò)濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax針頭式過(guò)濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
標準品 | ||
12-N-12774-100MG | 二甲基黃[60-11-7] | 100 mg |
50P-C12604600 | 二乙基黃[2481-94-9] | 100 mg |
色譜柱及保護柱 | ||
87003 | 超液相色譜柱 Endeavosil C18 | 100 × 2.1 mm,1.8 μm |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50102 | 甲醇 HPLC級 | 4 L |
50144 | 甲酸 HPLC級 | 50 mL |
通用色譜產(chǎn)品 | ||
52401B | 瓶架/藍色(現貨) | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色(現貨) | 50孔 |
1034 | 樣品瓶(棕色/螺紋) | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝) | 100/pk |
H80465 | HPLC 進(jìn)樣針 | 25 μL |
紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*
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