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網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)支持 ◇ 食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法解決方案
食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法解決方案
  • 更新日期:2017-03-13     信息來(lái)源:本站      瀏覽次數:7995
    • 三氯蔗糖又名三氯半乳蔗糖,俗稱(chēng)蔗糖素,由英國泰萊公司(Tate&Lyie)與倫敦大學(xué)共同研制并于1976年申請的一種新型甜味劑。由于其具有甜度高(甜度為蔗糖的600倍)、甜味純正等特點(diǎn),被認為是目前zui的功能性甜味劑之一,代表了目前強力甜味劑研究的zui高水平。雖然科學(xué)家們經(jīng)過(guò)長(cháng)期的毒理實(shí)驗證明其具有較高的安全性,但也有三氯蔗糖可誘發(fā)偏頭疼發(fā)作的報道。

      建立食品中三氯蔗糖的測定方法,可為食品生產(chǎn)企業(yè)提供生產(chǎn)性指導,并為質(zhì)量監督部門(mén)提供食品質(zhì)量監管依據。我國國家標準《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》中制定了三氯蔗糖的HPLC-ELSD檢測方法。

      方法優(yōu)勢:

      迪馬科技在參考國家標準《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》基礎上,進(jìn)行了方法優(yōu)化,推出《食品中三氯蔗糖的測定》方法,該方法:

      1. 采用固相萃取-液相色譜法測定食品中的三氯蔗糖,使用ProElut PLS 固相萃取柱凈化樣品,通過(guò)HPLC-ELSD檢測;

      2. 前處理步驟簡(jiǎn)單、凈化效果好、重現性好,定量限7.5 mg/kg,符合《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》對三氯蔗糖的*規定;

      3. 適用于各省市出入境、質(zhì)檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機構、食品檢測機構、大型食品生產(chǎn)商、高校和科研院所等。

      以下為詳細解決方案,敬請參考!

      食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法

      1、適用范圍                                                                                        

      本方案適用于液態(tài)奶、酸奶、醬油、醋、餅干、奶酪、奶茶、可樂(lè )和果凍中三氯蔗糖的檢測,方法定量限7.5 mg/kg。

      2、標準品配制

      標準儲備溶液:準確稱(chēng)取標準品,用水配制成10 mg/mL的儲備液,吸取一定體積10 mg/mL儲備液用水配成濃度為1000 μg/mL的儲備液。

      3、提取

      3.1 含蛋白脂肪類(lèi)液體:液態(tài)奶、酸奶、醬油和醋

      10 mL樣品,加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液,振蕩2 min,超聲提取5 min,6000 rpm離心5 min,取10 mL上清液,待凈化;

      3.2 含蛋白脂肪類(lèi)固體:餅干、奶酪和奶茶

      5 g樣品,加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液,振蕩2 min,超聲提取5 min,6000 rpm離心5 min,取10 mL上清液,待凈化;

      3.3 飲料:可樂(lè )(量取前超聲排氣泡)

      10 mL樣品,加入10 mL 水,混勻,取10 mL,待凈化;

      3.4 果凍

      5 g樣品,加入5 mL 水,熱水超聲溶解,混勻,趁熱凈化。

      注:《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》中提取液為75%甲醇水溶液,減壓濃縮過(guò)程中暴沸嚴重,不易操作。

      4、凈化——ProElut 200 mg/6 mL PLS(Cat.#:68012)

      (1)活    化:

      依次向柱中加入5 mL甲醇、5   mL水,棄去流出液;

      (2)上    樣:

      將待凈化液加入柱中,棄去流出液(控制流速不超過(guò)每秒1滴);

      (3)淋    洗:

      (4)洗    脫:

      向柱中加入5 mL   20%甲醇水溶液,棄去流出液;

      向柱中加入3 mL甲醇,收集流出液;

      (5)定    容:

      將洗脫液在50 ℃下減壓蒸干,用流動(dòng)相定容至1 mL,供HPLC分析。

      5、色譜條件

      色譜柱:Diamonsil C18(2) 150 × 4.6 mm,5 μm(Cat.#:99601)

      流速:1.0 mL/min

      進(jìn)樣量:20 μL

      柱溫:35 ℃

      檢測器:SEDEX LT-ELSD,溫度:40℃,壓力:3.5 bar,Gain:6

      流動(dòng)相:A:水;B:乙腈

      梯度設置

      時(shí)間/Min.

      0

      14

      15

      22

      23

      30

      A(%)

      89

      89

      10

      10

      89

      89

      B(%)

      11

      11

      90

      90

      11

      11

      6、添加回收結果

      食品中三氯蔗糖的HPLC檢測的添加回收結果

       

      添加水平200 mg/kg

      添加水平20 mg/kg

      添加水平7.5 mg/kg

      空白含量(μg/mL)

      回收率(%)

      加標量

      回收率(%)

      加標量

      回收率(%)

      加標量

      早餐奶

      99.01

      10 mg/mL 200 μL

      109.82

      1000 μg/mL

      200 μL

      96.52

      1000 μg/mL

      75 μL

      巧克力奶

      99.70

      10 mg/mL 200 μL

      100.91

      1000 μg/mL

      200 μL

      95.88

      1000 μg/mL

      75 μL

      咖啡奶

      100.34

      10 mg/mL 200 μL

      112.34

      1000 μg/mL

      200 μL

      126.00

      1000 μg/mL

      75 μL

      養樂(lè )多

      128.83

      10 mg/mL 200 μL

      130.8

      酸奶

      105.58

      1000 μg/mL

      200 μL

      123.42

      1000 μg/mL

      75 μL

      醬油

      77.85

      10 mg/mL

      200 μL

      113.48

      108.22

      10 mg/mL

      200 μL

      143.64

      1000 μg/mL

      200 μL

      205.47

      1000 μg/mL

      75 μL

      餅干

      102.64

      1000 μg/mL

      100 μL

      103.28

      1000 μg/mL

      37.5 μL

      奶酪

      88.04

      1000 μg/mL

      100 μL

      82.78

      1000 μg/mL

      37.5 μL

      奶茶

      101.48

      1000 μg/mL

      100 μL

      169.05

      1000 μg/mL

      37.5 μL

      可樂(lè )

      103.97

      1000 μg/mL

      200 μL

      98.49

      1000 μg/mL

      75 μL

      果凍

      93.89

      1000 μg/mL

      100 μL

      96.27

      1000 μg/mL

      37.5 μL

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      食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法相關(guān)產(chǎn)品信息:

      貨號

      名稱(chēng)

      規格

      樣品前處理

      68012

      ProElut PLS

      200 mg/6 mL, 30/pk

      244358

      12管防交叉污染真空SPE萃取裝置

      12位

      4803

      1,3,6mL柱管通用連接器

      15/pk

      4806

      考克(控制流量)

      15/pk

      99011

      真空/正壓兩用泵,無(wú)油

      1/pk

      99013

      抽濾瓶套裝

      (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞)

      1/pk

      30039

      FitMax針頭式過(guò)濾器   Nylon

      13 mm,0.22 μm   100/pk

      30040

      FitMax針頭式過(guò)濾器   Nylon

      13 mm,0.45 μm   100/pk

      標準品

      53-69293-100G

      三氯蔗糖[56038-13-2]

      100 g

      色譜柱及保護柱

      99601

      Diamonsil C18(2)

      150 × 4.6 mm,5 μm

      HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑

      50101

      乙腈  HPLC級

      4 L

      50102

      甲醇  HPLC級

      4 L

      通用色譜產(chǎn)品

      52401B

      瓶架/藍色(現貨)

      50孔

      52401A

      瓶架/白色(現貨)

      50孔

      1034

      樣品瓶(棕色/螺紋)

      2 mL, 100/pk

      1035

      樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝)

      100/pk

      H80465

      HPLC 進(jìn)樣針

      25 μL

      紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*

       

    北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

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