通用型反相色譜柱由工廠(chǎng)測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時(shí)間以流動(dòng)相來(lái)平衡色譜柱,您就會(huì )在處理問(wèn)題方面獲得zui大的”補償”,而且您的色譜柱的壽命也會(huì )變得更長(cháng)。
通用型反相色譜柱操作步驟:
a.平衡開(kāi)始時(shí)將流速緩慢地提高,用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線(xiàn)(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長(cháng)的時(shí)間來(lái)平衡)
b.如果使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應注意用純水”過(guò)渡”即每天分析開(kāi)始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動(dòng)相平衡;分析結束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護柱子。
2.通用型反相色譜柱的再生
長(cháng)期使用的通用型反相色譜柱,往往柱效會(huì )下降(柱子的理論塔板數減低)??梢詫ιV柱進(jìn)行再生,在有條件的實(shí)驗室應使用一個(gè)廉價(jià)的泵進(jìn)行柱子的再生。
通用型反相色譜柱在使用過(guò)程中易出現的問(wèn)題和解決辦法
通用型反相色譜柱在使用中zui常見(jiàn)的問(wèn)題就是柱壓升高,如果柱壓是在長(cháng)時(shí)間使用過(guò)程中緩慢增加,屬于正?,F象。但柱壓在使用過(guò)程中突然升高(系統管路堵塞及壓力傳感器故障除外),通用型反相色譜柱頭的過(guò)濾篩板堵塞或污染,如確定是色譜柱頭的過(guò)濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸內超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色譜柱。