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網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)支持 ◇ 極性改性反相色譜柱的維護
極性改性反相色譜柱的維護
  • 更新日期:2017-04-11     信息來(lái)源:本站      瀏覽次數:1873
    • 極性改性反相色譜柱使用過(guò)程中不能碰撞、彎曲或強烈震動(dòng)。當柱子和色譜儀連結時(shí),閥件或管路一定要清洗干凈。以下從流動(dòng)相、樣品、保護柱等方面提出色譜柱維護應注意的一些問(wèn)題。
      (1)流動(dòng)相:流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過(guò)濾處理。即使儀器配有自動(dòng)脫氣機,也采用超聲脫氣或其它簡(jiǎn)便的脫氣方法對流動(dòng)相進(jìn)行預脫氣。盡量避免使用高粘度溶劑(如異丙醇)作為流動(dòng)相,避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化。流動(dòng)相應盡量使用色譜純,減少流動(dòng)相中雜質(zhì)對色譜柱的污染和對檢測器的影響。水用超純水,流動(dòng)相用0.45μm或0.22μm的膜過(guò)濾。大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2~7.5,硅膠柱pH>8時(shí)會(huì )發(fā)生硅膠溶脫,鍵合型柱pH<2時(shí)會(huì )發(fā)生鍵合相斷裂,流動(dòng)相盡量不超過(guò)色譜柱的pH范圍。普通C18柱盡量避免在40℃以上的溫度下分析。柱內不溶物容易引起色譜柱的堵塞,影響樣品的分離。不溶物產(chǎn)生的原因是有溶劑的不互溶、樣品溶解液和流動(dòng)相不互溶或者由于溫度改變或固定相干涸而產(chǎn)生沉淀。為避免上述問(wèn)題,要注意溶劑之間的互溶性。若兩種溶劑不互溶,需經(jīng)過(guò)中間溶劑慢慢過(guò)渡。保存時(shí)應將色譜柱兩端密封,并盡量保持室溫恒定。
       
      (2)樣品:對內徑5μm的柱子,樣品需經(jīng)0.45μm的膜過(guò)濾,更細的柱子要0.22μm的膜過(guò)濾?;w比較復雜的樣品需經(jīng)過(guò)一定的樣品預處理,例如海洋沉積物、中藥提取液、體液等,需要采用萃取等方法除去對柱子有損壞的較大雜質(zhì),例如色素、多糖、蛋白質(zhì)等。盡量減少進(jìn)樣量,避免過(guò)載。
       
      (3)保護柱:使用預柱作為保護柱,減少污染物對分析柱的損傷。壓力升高通常是需要更換預柱的信號。

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