反相液相色譜柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟和有效的保護，延長(cháng)了色譜柱的壽命，保證分析結果的重現性。隨著(zhù)使用時(shí)間的增加，液相色譜柱分離效能下降，柱壓增高，其原因主要是由于色譜柱進(jìn)口段的少量填料被污染引起的，而色譜柱整個(gè)柱床并未被破壞，使用保護柱，相當于在色譜柱前增加了一段額外的填料，起到了保護整個(gè)色譜柱的作用。

 

反相液相色譜柱特點(diǎn)：

采用高度可控的單分子層形成和封尾技術(shù)

高的柱間重現性

高的選擇性和分離效率

適合分離酸性、中性和堿性化合物，以及許多藥物和多肽等

推薦使用有機溶劑或有機溶劑/水體系的流動(dòng)相

 

反相液相色譜柱在使用緩沖液的過(guò)程中還要注意以下幾點(diǎn)：

a.避免使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對鋼質(zhì)有腐蝕作用；

b.緩沖液要現配現用，往往緩沖液是良好的菌類(lèi)培養液，隔天或放置長(cháng)時(shí)間實(shí)驗時(shí)會(huì )發(fā)生很多怪現象；

c.使用緩沖液要及時(shí)掌握pH范圍，做到胸中有數；

d.清洗液路和柱子時(shí)，有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗；

e.長(cháng)時(shí)間用緩沖溶液要注意觀(guān)察接頭處有無(wú)析出，若有白色鹽類(lèi)析出，定期用10%硝酸沖洗液路可以避免液路的堵塞；

f.選擇緩沖液要用可靠的試劑，避免不純的鹽類(lèi)造成不必要的麻煩；

過(guò)渡流動(dòng)相是指有機相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同，但是不含緩沖鹽的溶液。