液相色譜柱在使用前，要先進(jìn)行柱的性能測試，并將結果保存起來(lái)，作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照色譜柱出廠(chǎng)報告中的條件進(jìn)行(出廠(chǎng)測試所使用的條件是佳條件)，只有這樣，測得的結果才有可比性。注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。  

1、樣品的前處理  

建議使用流動(dòng)相溶解樣品；  

使用預處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)；  

使用0.45μm的過(guò)濾膜過(guò)濾除去微粒雜質(zhì)。  

2、流動(dòng)相的配制  

液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的，因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn)：  

流動(dòng)相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會(huì )沉淀在柱中(或長(cháng)時(shí)間保留在柱中)；  

流動(dòng)相與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應；  

流動(dòng)相的黏度要盡量小，以便得到好的分離效果；降低柱壓降，延長(cháng)泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度)；  

流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器，建議使用對紫外吸收較低的溶劑配制；  

流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導致實(shí)驗無(wú)法進(jìn)行。  

在流動(dòng)相配制好后，一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。  

3、流動(dòng)相流速的選擇  

因柱效是柱中流動(dòng)相線(xiàn)性流速的函數，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的色譜柱，要追求佳柱效，建議使用佳流速。對內徑為4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1ml／min，對于內徑為4.0mm柱，流速0.8ml／min為佳。  

當選用佳流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長(cháng)?？刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強度的方法以縮短分析時(shí)間(如使用反相柱時(shí)，可適當增加甲醇或乙腈的含量)。  

注意：  

含水流動(dòng)相盡量在實(shí)驗前配制，尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動(dòng)相不要過(guò)夜。建議加入*，防止細菌生長(cháng)。  

流動(dòng)相要求使用0.45μm濾膜過(guò)濾，除去微粒雜質(zhì)。  

使用HPLC級溶劑配制流動(dòng)相，使用合適的流動(dòng)相可延長(cháng)色譜柱的使用壽命，提高柱性能。