固相萃取柱是利用固體吸附劑將樣品中的目標化合物吸附,與樣品的基體和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫,達到分離和和富集的目的。先使樣品通過(guò)一裝有吸附劑(固相)小柱,保留其中某些組分,再選用適當的溶劑沖洗雜質(zhì),然后用少量溶劑迅速洗脫,從而達到快速分離凈化與濃縮的目的。
固相萃取柱的萃取步驟:
(1)預處理
在萃取樣品之前,吸附劑必須經(jīng)過(guò)適當的預處理,一足為了潤濕和活化固相萃取填料,以使目標萃取物與固相表面緊密接觸,易于發(fā)生分子間相互作用;二是為了除去填料中可能存在的雜質(zhì).減少污染。采取的方法是用一定量溶劑沖洗萃取柱。
反相類(lèi)型的固相萃取硅膠和非極性吸附劑介質(zhì),通常用水溶性有機溶劑如甲醇預處理,甲醇潤濕吸附劑表面和滲透鍵臺烷基相,便于水更有效地潤濕硅膠表面。然后用水或緩沖溶液替換滯留在柱中的甲醇,以使樣品水溶液與吸附劑表面有良好的接觸,提高萃取效率。正相類(lèi)型的固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì),通常用樣品所在的有機溶劑來(lái)預處理。離子交換填料一般用3—5ml。去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來(lái)預處理。
固相萃取填料從預處理到樣品加入都應保持濕潤,如果在樣品加入之前,萃取柱中的填料于了,需要重復預處理過(guò)程。并且在重新引入有機溶劑之前,先要用水沖洗革取柱內緩沖溶液中的鹽分。
(2)上樣
將樣品倒^活化后的SPE小柱,然后利用加壓、抽真空或離心的方法使樣品進(jìn)入吸附劑。采取手動(dòng)或泵以正壓推動(dòng)或負壓抽吸方式,使液體樣品以適當流速通過(guò)萃取柱,此時(shí),樣品中的日標萃取物被吸附在萃取柱填料上。
(3)洗擊干擾雜質(zhì)
洗滌的目的是為r除去吸附在固相萃取柱上的少量基體下擾組分。一般選擇中等強度的混合溶劑,盡可能除去基體中的干擾組分,又不會(huì )導致目標萃取物流失。如反相萃取體系常選用一定比例組成的有機溶劑水混合液,有機溶劑比例應大于樣品溶液而小于洗脫劑溶液。
(4)洗脫及收集分析物
選擇適當的洗脫溶劑洗脫被分析物,收集洗脫液,揮干溶劑以備后用或直接進(jìn)行在線(xiàn)分析。為了盡可能將分析物洗脫,使比分析物吸附更強的雜質(zhì)留在SPE柱上,需要選擇強度合適的洗脫溶劑。