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網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)支持 ◇ 2020年國抽項目——茶葉中農藥殘留的檢測
2020年國抽項目——茶葉中農藥殘留的檢測
  • 更新日期:2020-04-28     信息來(lái)源:本站      瀏覽次數:5179
    •  

      2020年《國家食品安全監督抽檢實(shí)施細則》(簡(jiǎn)稱(chēng)國抽)2019年相比,在茶葉的檢驗項目中,刪除了除蟲(chóng)脲、多菌靈、甲氰菊酯、滴滴涕和特丁硫磷的檢測,新增了內吸磷、乙酰甲胺磷、丙溴磷、毒死蜱和莠去津的檢驗項目。

      迪馬科技按照2020版國抽細則的要求,參考GB 23200.13-2016 食品安全國家標準 茶葉中448種農藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 液相色譜-質(zhì)譜法》、GB/T 23204-2008 茶葉中519種農藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法》、GB 23200.113-2018 食品安全國家標準 植物源性食品中208種農藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》、SN/T 4655-2016 出口食品中草甘膦及其代謝物殘留量的測定方法 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》等相關(guān)標準,采用SPE、QuEChERS結合GC-MS、UPLC-MS/MS建立了一系列茶葉中農藥殘留的檢測方法,系列方法中涵蓋了所有2020版國抽細則中茶葉檢驗項目下的農藥,可供廣大分析工作者參考!

      方法一   SPE-UPLC-MS/MS

      1、適用范圍

         本方法適用于茶葉中的克百威、滅多威、3-羥基克百威、茚蟲(chóng)威、甲胺磷、氧樂(lè )果、啶蟲(chóng)脒、吡蚜酮、吡蟲(chóng)啉和內吸磷(O+S)的檢測。

      2、標準品配制

      (1) 單標儲備液1.0 mg/mL: 準確稱(chēng)取適量各標準品,用乙腈配制成1.0 mg/mL的單標儲備液;

      (2) 混標儲備液5.0 μg/mL: 分別吸取各單標儲備液,用乙腈配制成5.0 μg/mL混標儲備液;

      (3) 混標中間液1.0 μg/mL: 吸取混標儲備液,用乙腈配制成1.0 μg/mL混標儲備液。

      3、提取

      (1) 10.0 g樣品,加入30 mL乙腈,振蕩5 min,6000 rpm離心5 min,取出上清液;

      (2) 向下層殘渣中繼續加入30 mL、20 mL乙腈,按照步驟(1)重復提取兩次;

      (3) 合并三次提取液,在40 水浴中減壓蒸至1 mL,加入乙腈復溶,并轉移到具塞試管中定容至5 mL,取出1 mL,待凈化。

      4、凈化—— ProElut TPC 12 mL (Cat.# 65354)

      (1)活    化:

      加入10 mL乙腈-甲苯(3-1)活化,棄去流出液;

      (2)上    樣:

      加入1 mL待凈化液,收集流出液;

      (3)洗    脫:

      加入25 mL乙腈-甲苯(3-1),收集流出液,合并(2)(3)流出液;

      (4)重新溶解:

      將流出液在40 水浴中旋轉濃縮至約0.5 mL,然后在室溫下用氮氣緩慢吹干,加1 mL甲醇溶解,上機分析。

      :  同方法制備基質(zhì)匹配標準溶液

      5、分析條件

      UPLC 條件

      色譜柱: Leapsil C18,100 x 2.1 mm,2.7 μm (Cat#: 86005)

       : 0.4 mL/min    進(jìn)樣量: 1 μL   柱  溫: 35

      流動(dòng)相: A: 0.1%甲酸水    B: 乙腈

      梯度設置

      時(shí)間(Min)

      0

      3

      6

      7

      8

      10

      11

      17

      A(%)

      95

      70

      60

      60

      5

      5

      95

      95

      B(%)

      5

      30

      40

      40

      95

      95

      5

      5

       

      質(zhì)譜條件

      電離模式: ESI掃描方式: 正離子掃描

      檢測方式: 多反應監測電噴霧電壓: 5500 V

      霧化氣壓力: 50 psi輔助氣壓力: 50 psi

      氣簾氣壓力: 20 psi離子源溫度: 500

       

      定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見(jiàn)下表

      藥物名稱(chēng)

      定性離子對

      定量離子對

      碰撞氣能量/eV

      去簇電壓/V

      (m/z)

      (m/z)

      (母離子/子離子)

      (母離子/子離子)

      克百威

      222.0/123.0

      222.0/123.0

      21

      66

      222.0/165.0

      15

      滅多威

      163.0/88.0

      163.0/88.0

      8

      30

      163.0/106.0

      15

      3-羥基克百威

      238.1/163.0

      238.1/163.0

      19

      80

      238.1/181.1

      16

      茚蟲(chóng)威

      528.1/249.1

      528.1/249.1

      23

      90

      528.1/218.2

      30

      甲胺磷

      142.1/94.0

      142.1/94.0

      17

      65

      142.1/124.9

      17

      142.1/112.0

      17

      氧樂(lè )果

      214.4/155.0

      214.4/155.0

      20

      56

      214.4/141.2

      19

      74

      啶蟲(chóng)脒

      223.1/126.0

      223.1/126.0

      27

      75

      223.1/56.1

      30

      223.1/90.0

      45

      吡蚜酮

      218.2/104.9

      218.2/104.9

      27

      60

      218.2/79.0

      51

      吡蟲(chóng)啉

      256.1/209.0

      256.1/209.0

      21

      65

      256.1/127.0

      21

      內吸磷(O+S)

      259.2/89.1

      259.2/89.1

      12

      45

      259.2/61.0

      40

       

      6、添加回收結果

      1 綠茶中10種農藥殘留檢測的添加回收結果(%)

      目標物

       

      添加水平10 μg/kg

      基質(zhì)效應(%)基質(zhì)標/溶劑標

      加標量: 中間液混標1.0 μg/mL, 100 μL

      克百威

      108

      88.5

      滅多威

      114

      158

      3-羥基克百威

      106

      83.1

      茚蟲(chóng)威

      120

      101

      甲胺磷

      91.7

      95.5

      氧樂(lè )果

      97.3

      91.8

      啶蟲(chóng)脒

      112

      139

      吡蚜酮

      92.8

      81.6

      吡蟲(chóng)啉

      125

      102

      內吸磷(O+S)

      82

      93

       

       

      1 10種農藥標準品20.0 μg/LMRM色譜圖

       


       

      2  10種農藥標準品20.0 μg/LXIC色譜圖


      方法二   QuEChERS-UPLC-MS/MS

      1、適用范圍

          本方法適用于茶葉中的克百威、滅多威、3-羥基克百威、茚蟲(chóng)威、甲胺磷、乙酰甲胺磷、敵百蟲(chóng)、氧樂(lè )果、啶蟲(chóng)脒、吡蟲(chóng)啉和內吸磷(O+S)的檢測。

      2、標準品配制

      (1) 單標儲備液1.0 mg/mL: 準確稱(chēng)取適量各標準品,用乙腈配制成1.0 mg/mL的單標儲備液;

      (2) 混標儲備液5.0 μg/mL: 分別吸取各單標儲備液,用乙腈配制成5.0 μg/mL混標儲備液;

      (3) 混標中間液1.0 μg/mL: 吸取混標儲備液,用乙腈配制成1.0 μg/mL混標儲備液。

      3、提取

      (1) 2.0 g樣品,加入10 mL水混勻,浸泡30 min;

      (2) 繼續加入15 mL 乙腈,振蕩5 min;

      (3) 加入6 g 無(wú)水硫酸鎂和1.5 g乙酸鈉(Cat#: 64520S),振蕩1 min,6000 rpm離心5 min;

      (3) 取出8 mL上清液,待凈化。

      4、凈化——ProElut QuE 15 mL Tube (Cat#: 64622)

          將待凈化液加入到15 mL ProElut QuEChERS凈化管,渦旋混合1 min,6000 rpm離心5 min,準確取2 mL上清液于5 mL氮吹管中,40 水浴中氮氣吹至近干,加入1 mL甲醇,混勻,上機分析。

      :  同方法制備基質(zhì)匹配標準溶液

      5、分析條件

      UPLC 條件

      色譜柱: Leapsil C18,100 x 2.1 mm,2.7 μm (Cat#: 86005)

       : 0.4 mL/min    進(jìn)樣量: 1 μL   柱  溫:  35

      流動(dòng)相: A: 0.1%甲酸水    B: 乙腈

      梯度設置

      時(shí)間(Min)

      0

      3

      6

      7

      8

      10

      11

      17

      A(%)

      95

      70

      60

      60

      5

      5

      95

      95

      B(%)

      5

      30

      40

      40

      95

      95

      5

      5

       

      質(zhì)譜條件

      電離模式: ESI掃描方式: 正離子掃描

      檢測方式: 多反應監測電噴霧電壓: 5500 V

      霧化氣壓力: 50 psi輔助氣壓力: 50 psi

      氣簾氣壓力: 20 psi離子源溫度: 500

       

      定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見(jiàn)下表

      藥物名稱(chēng)

      定性離子對

      定量離子對

      碰撞氣能量/eV

      去簇電壓/V

      (m/z)

      (m/z)

      (母離子/子離子)

      (母離子/子離子)

      克百威

      222.0/123.0

      222.0/123.0

      21

      66

      222.0/165.0

      15

      滅多威

      163.0/88.0

      163.0/88.0

      8

      30

      163.0/106.0

      15

      3-羥基克百威

      238.1/163.0

      238.1/163.0

      19

      80

      238.1/181.1

      16

      茚蟲(chóng)威

      528.1/249.1

      528.1/249.1

      23

      90

      528.1/218.2

      30

      甲胺磷

      142.1/94.0

      142.1/94.0

      17

      65

      142.1/124.9

      17

      142.1/112.0

      17

      乙酰甲胺磷

      184.0/143.0

      184.0/95.0

      10

      60

      184.0/95.0

      29

      敵百蟲(chóng)

      256.9/109.0

      256.9/109.0

      22

      80

      256.9/127.0

      20

      氧樂(lè )果

      214.4/155.0

      214.4/155.0

      20

      56

      214.4/141.2

      19

      74

      啶蟲(chóng)脒

      223.1/126.0

      223.1/126.0

      27

      75

      223.1/56.1

      30

      223.1/90.0

      45

      吡蟲(chóng)啉

      256.1/209.0

      256.1/209.0

      21

      65

      256.1/127.0

      21

      內吸磷(O+S)

      259.2/89.1

      259.2/89.1

      12

      45

      259.2/61.0

      40

      6、添加回收結果

      1 綠茶中11種農藥殘留檢測的添加回收結果(%)

      目標物

      添加水平50 μg/kg

      基質(zhì)效應(%)基質(zhì)標/溶劑標

      加標量:  中間液混標1.0 μg/mL, 100 μL

      克百威

      89%

      96%

      滅多威

      113%

      303%

      3-羥基克百威

      82%

      94%

      茚蟲(chóng)威

      70%

      102%

      甲胺磷

      77%

      92%

      乙酰甲胺磷

      83%

      134%

      敵百蟲(chóng)

      83%

      83%

      氧樂(lè )果

      91%

      96%

      啶蟲(chóng)脒

      97%

      327%

      吡蟲(chóng)啉

      105%

      77%

      內吸磷(O+S)

      78%

      112%

       

       

      1 11種農藥標準品13.3 μg/LMRM色譜圖

        


      2  11種農藥標準品13.3 μg/LXIC色譜圖

       

      方法三   SPE-GC-MS

      1、適用范圍

          本方法適用于茶葉中內吸磷(O+S)、滅線(xiàn)磷、甲拌磷、莠去津、氯唑磷、甲拌磷亞砜、甲拌磷砜、毒死蜱、三氯殺螨醇、水胺硫磷、丙溴磷、聯(lián)苯菊酯、氯氰菊酯和高效氯氰菊酯、氰戊菊酯和S-氰戊菊酯的檢測。

      2、標準品配制

      (1) 單標標準儲備液: 準確稱(chēng)取各農藥標準品于10 mL容量瓶中,用甲苯溶解,并定容至刻度;

      (2) 混合標準儲備液: 根據測定需要,吸取適量體積的單標標準儲備液于50 mL容量瓶中,并用乙酸乙酯定容至刻度;

      (3) 混合標準中間液1: 吸取5 mL混合標準儲備液于10 mL容量瓶中,并用乙酸乙酯定容至刻度;

      (4) 混合標準中間液2: 吸取1 mL混合標準儲備液于10 mL容量瓶中,并用乙酸乙酯定容至刻度。

      目標化合物

      濃度(μg/mL)

      混合標準儲備液

      混合標準中間液1

      混合標準中間液2

      內吸磷(O+S)

      20

      10

      2.0

      滅線(xiàn)磷

      15

      7.5

      1.5

      甲拌磷

      10

      5

      1.0

      莠去津

      50

      25

      5.0

      氯唑磷

      10

      5

      1.0

      甲拌磷亞砜

      10

      5

      1.0

      甲拌磷砜

      10

      5

      1.0

      毒死蜱

      50

      25

      5.0

      三氯殺螨醇

      10

      5

      1.0

      水胺硫磷

      50

      25

      5.0

      丙溴磷

      50

      25

      5.0

      聯(lián)苯菊酯

      25

      12.5

      2.5

      氯氰菊酯和高效氯氰菊酯

      50

      25

      5.0

      氰戊菊酯S-氰戊菊酯

      20

      10

      2.0

      3、提取

      (1) 5.0 g樣品于50 mL離心管中,加入15 mL乙腈,振蕩5 min,8000 rpm離心5 min,收集上層清液;

      (2) 向下層殘渣中再加入15 mL乙腈,按步驟(1)重復提取一次,合并上清液;

      (3) 將上清液在40 水浴下減壓蒸至約1 mL,加入6 mL乙腈-甲苯(3-1)溶解,待凈化。

      4、凈化——ProElut TPC 12 mL (Cat#: 65354)

      (1)活    化:

      加入10 mL乙腈-甲苯(3-1),棄去流出液;

      (2)上    樣:

      將待凈化液加入柱中,收集流出液;

      (3)洗    脫:

      加入25 mL乙腈-甲苯(3-1),合并(2)(3)流出液;

      (4)重新溶解:

      將洗脫液在40 水浴下減壓蒸干,用乙酸乙酯定容至1 mL,混勻,供GC-MS分析。

      :  同方法制備基質(zhì)匹配標準溶液。

      5、GC-MS條件

      色譜柱: DM-5MS, 30 m × 0.32 mm × 0.25 μm (Cat.# 8231)

      進(jìn)樣口溫度: 240

      升溫程序: 初始溫度70 ,保持2 min,以25 /min升溫至150 ,再以3 /min升溫至200 ,再以8 /min升溫至280 ,保持12 min

      載氣: 氦氣,柱流速: 1.46 mL/min

      進(jìn)樣方式: 不分流進(jìn)樣

      進(jìn)樣量: 1.0 μL

      離子源溫度: 230

      接口溫度: 280

      溶劑延遲: 6 min

      電子轟擊電離源(EI): 選擇離子監測模式(SIM),分組監測見(jiàn)表1

      1 選擇離子監測組表

      通道

      起始時(shí)間(min)

      結束時(shí)間(min)

      選擇離子(m/z)

      1

      9.70

      11.20

      158,200,242,88,115,171

      2

      11.60

      13.90

      260,121,231,88,114,170,200,215,173

      3

      14.50

      15.50

      161,257,285

      4

      17.90

      20.00

      125,153,97,314,258,286,139,141,250,136,121,230

      5

      23.00

      25.00

      339,374,297

      6

      28.00

      30.00

      181,166,165

      7

      32.00

      43.87

      181,152,180,167,225,419,125

       

      6、添加回收結果

      綠茶和紅茶中多種農藥殘留量的GCMS檢測添加回收結果

      目標化合物

      添加濃度(mg/kg)

      (加標量: 混合標準中間液1,加50 μL)

      回收率(%)

      添加濃度(mg/kg)

      (加標量: 混合標準中間液2,加50 μL)

      回收率(%)

      綠茶

      紅茶

      綠茶

      紅茶

      內吸磷(O+S)

      0.1

      79.41

      75.44

      0.02

      73.99

      73.23

      滅線(xiàn)磷

      0.075

      97.87

      92.21

      0.015

      84.14

      90.30

      甲拌磷

      0.05

      93.09

      77.50

      0.01

      87.64

      75.28

      莠去津

      0.25

      88.92

      85.02

      0.05

      85.96

      82.33

      氯唑磷

      0.05

      98.33

      91.77

      0.01

      87.96

      87.74

      甲拌磷亞砜

      0.05

      96.05

      97.89

      0.01

      99.73

      87.17

      甲拌磷砜

      0.05

      99.10

      93.79

      0.01

      86.00

      84.28

      毒死蜱

      0.25

      101.15

      91.08

      0.05

      88.21

      84.23

      三氯殺螨醇

      0.05

      89.79

      85.44

      0.01

      80.25

      87.10

      水胺硫磷

      0.25

      97.97

      90.47

      0.05

      91.88

      81.02

      丙溴磷

      0.25

      95.46

      85.85

      0.05

      83.23

      77.98

      聯(lián)苯菊酯

      0.125

      102.37

      93.98

      0.025

      94.47

      86.04

      氯氰菊酯

      高效氯氰菊酯

      0.25

      98.21

      91.93

      0.05

      94.17

      89.73

      氰戊菊酯

      S-氰戊菊酯

      0.1

      109.83

      105.98

      0.02

      119.19

      102.30

       

      14種農藥殘留標準(10 μg/mL)TIC

       

       

      方法四   SPE-UPLC-MS/MS

      1、適用范圍

          本方法適用于綠茶、花茶、鐵觀(guān)音、紅茶和普洱茶中氨甲基膦酸和草甘膦的檢測,定量限0.1 mg/kg。

      2、標準品配制

      單標標準儲備液: 準確稱(chēng)取各標準品,用水配制成1000 μg/mL的單標標準儲備液。

      混標標準中間液: 分別吸取各單標標準儲備液,用水配制成1.0 μg/mL、10 μg/mL50 μg/mL的混標標準中間液。

      3、提取

          1 g茶葉于50 mL離心管中,準確加入10 mL水、10 mL二氯甲烷,振蕩10 min,超聲10 min,8000 rpm離心5 min,取5 mL上清液,待凈化。

      4、凈化——ProElut GLY 6 mL (Cat.#:  65938)

      (1)活  化:

      依次加入5 mL甲醇、5 mL水,棄去流出液;

      (2)上  樣:

      將待凈化液加入柱中,棄去前3 mL流出液,收集后2 mL流出液,混勻,濾液過(guò)0.22 μm尼龍濾膜,上機分析。

      : 同方法制備基質(zhì)匹配標準溶液。

      5、UPLC-MS/MS條件

      5.1 UPLC 條件

      色譜柱: Dikma Polyamino HILIC, 150 × 2.0 mm, 5 μm (Cat.#: 99302)

       : 0.2 mL/min     進(jìn)樣量: 10 μL      柱  溫: 35

      流動(dòng)相: A: 乙腈     B: 5 mM乙酸銨溶液,氨水調節至pH=11

      梯度設置:

      Time(min)

      0

      2

      2.1

      8

      8.1

      15

      A(%)

      80

      80

      20

      20

      80

      80

      B(%)

      20

      20

      80

      80

      20

      20

       

      5.2 質(zhì)譜條件

      電離模式: ESI

      掃描方式: 負離子掃描

      檢測方式: 多反應監測     

      電噴霧電壓: -4500 V

      霧化氣壓力: 60 psi       

      輔助氣壓力: 60 psi

      氣簾氣壓力: 35 psi       

      離子源溫度: 550

      定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見(jiàn)下表

      目標化合物

      定性離子對

      (m/z)

      (母離子/子離子)

      定量離子對

      (m/z)

      (母離子/子離子)

      碰撞氣能量/eV

      去簇電壓/V

      氨甲基膦酸

      109.9/62.8

      109.9/62.8

      -23

      -53

      109.9/78.9

      -35

      -51

      草甘膦

      167.8/62.8

      167.8/62.8

      -30

      -50

      167.8/81.0

      -21

      -31

      6、添加回收結果

      茶葉中氨甲基膦酸和草甘膦LC-MS/MS檢測添加回收結果

      樣品

      基質(zhì)

      回收率(%)

      添加水平: 0.1 mg/kg

      添加水平: 1 mg/kg

      添加水平: 5 mg/kg

      加標量: 1.0 μg/mL,加100 μL

      加標量: 10 μg/mL,加100 μL

      加標量: 50 μg/mL,加100 μL

      氨甲基膦酸

      草甘膦

      氨甲基膦酸

      草甘膦

      氨甲基膦酸

      草甘膦

      綠茶

      103

      91

      99

      109

      92

      101

      花茶

      95

      105

      109

      85

      93

      99

      鐵觀(guān)音

      84

      81

      83

      94

      80

      100

      紅茶

      100

      101

      86

      85

      89

      98

      普洱茶

      80

      95

      89

      95

      88

      102

       

       

      R^2 = 0.9990

      標準曲線(xiàn)濃度分別為: 10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、250 ng/mL、500 ng/mL

       

       

       

      R^2 = 0.9990

      標準曲線(xiàn)濃度分別為: 10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、250 ng/mL、500 ng/mL

       

      茶葉多種農藥殘留的檢測相關(guān)產(chǎn)品信息:  

      貨號

      名稱(chēng)

      規格

      標準品

      來(lái)電咨詢(xún)

      農藥殘留標準品

      多種規格

      樣品前處理

      65354

      茶葉中農殘檢測萃取柱 ProElut TPC

      12 mL, 20/pk

      64520s

      QuEChERS 萃取鹽 6 g MgSO4,1.5 g NaOAc

      50/pk

      64622

      15 mL 凈化管, 400mg PSA / 400mg C18 / 200mg Carb / 1200mg MgSO4

      50/pk

      65938

      草甘膦檢測固相萃取柱  ProElut GLY

      6 mL, 30/pk

      244358

      12管防交叉污染真空SPE萃取裝置

      12

      4803

      1,3,6 mL柱管通用連接器

      15/pk

      4806

      考克(控制流量)

      15/pk

      99011

      真空/正壓兩用泵,無(wú)油

      1/pk

      99013

      抽濾瓶套裝

      (包括硅橡膠管2,2 L抽濾瓶及橡膠塞)

      1/pk

      30039

      FitMax針頭式過(guò)濾器 Nylon

      13 mm, 0.22 μm 100/pk

      色譜柱及保護柱

      86005

      UHPLC/HPLC兼容色譜柱 Leapsil C18

      100 x 2.1 mm, 2.7 μm  

      8231

      氣相毛細柱 DM-5MS

      30 m × 0.32 mm × 0.25 μm

      99302

      Dikma Polyamino HILIC

      150 x 2.0 mm, 5 μm

      HPLC溶劑Ÿ緩沖鹽Ÿ離子對試劑

      50101

      乙腈  HPLC

      4 L

      50102

      甲醇  HPLC

      4 L

      50104

      乙酸乙酯  HPLC

      4 L

      50144

      甲酸 HPLC

      50 mL

      通用色譜產(chǎn)品

      52401B

      瓶架/藍色(現貨)

      50

      52401A

      瓶架/白色(現貨)

      50

      1034

      樣品瓶(棕色/螺紋)

      2 mL, 100/pk

      1035

      樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝)

      100/pk

      H80465

      HPLC 進(jìn)樣針

      25 μL

      紅色產(chǎn)品貨號#30039、#1034、#1035*……

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