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青貯飼料中有機酸的檢測解決方案

更新日期：2015-06-30 信息來(lái)源：本站瀏覽次數：4194

有機酸的含量與組成比例是確定青貯飼料發(fā)酵特性和評價(jià)青貯品質(zhì)的重要指標。青貯飼料質(zhì)量的好壞取決于乳酸菌作用，乳酸是乳酸菌的主要產(chǎn)物，其含量是反映青貯飼料質(zhì)量zui重要的指標，乙酸的生成量與青貯飼料品質(zhì)呈負相關(guān)，丙酸可以抑制真菌繁殖，防止二次發(fā)酵，丁酸由酪酸菌產(chǎn)生，可直接反應青貯飼料的腐敗程度。

方法優(yōu)勢

迪馬科技建立青貯飼料中有機酸的解決方案，采用ProElut PSA固相萃取柱，鹽酸水溶液洗脫，本方案簡(jiǎn)化前處理步驟，不使用有機溶劑，減少人體傷害，降低實(shí)驗成本，節省大量時(shí)間，并減少雜質(zhì)的干擾，回收率達80%以上。

以下為詳細解決方案，敬請參考！

1、適用范圍

適用于飼料中乳酸、乙酸、丙酸和丁酸的檢測。

2、樣品準備

(1) 取10 g樣品，加入90 mL水，充分混勻，超聲提取30 min浸泡過(guò)夜；

(2) 取出上層清液進(jìn)行過(guò)濾，收集濾液，待凈化。

3、SPE柱凈化——ProElut PSA 500 mg/6 mL (Cat.#：63205)

(1) 活化：	依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，棄去流出液；
(2) 上樣：	取1 mL待凈化液加入柱中，棄去流出液；
(3) 淋洗：	向柱中加入5 mL水，棄去流出液；
(4) 洗脫：	向柱中加入5 mL 0.5 mol/L 鹽酸水溶液，收集流出液；
(5) 定容：	將洗脫液用水定容至5 mL，供HPLC分析。

4、分析條件

色譜柱：	Suprsil C18，150 mm × 4.6 mm，5 μm（Cat# 82001）
流速：	1.0 mL/min
檢測器：	UV 214 nm
柱溫：	30 ℃
進(jìn)樣量：	20 μL
流動(dòng)相：	25 mmol/L 磷酸二氫鉀水溶液，用磷酸調pH至2.5

5、添加回收結果

飼料中有機酸添加回收結果

NO.	化合物名稱(chēng)	添加水平（mg/kg）	回收率（%）
1	乳酸	500	119.92
2	乙酸	200	112.27
3	丙酸	500	92.27
4	丁酸	1000	86.72

青貯飼料中有機酸的檢測相關(guān)產(chǎn)品信息：

貨號	名稱(chēng)	規格
樣品前處理
63205	ProElut PSA	500 mg/6 mL 30/pk
244358	12管防交叉污染真空SPE萃取裝置	12位
4803	1,3,6mL柱管通用連接器	15/pk
4806	考克(控制流量)	15/pk
99011	真空/正壓兩用泵，無(wú)油	1/pk
99013	抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞)	1/pk
37177	針頭式過(guò)濾器 Nylon	13 mm,0.22 μm 100/pk
37180	針頭式過(guò)濾器 Nylon	13 mm,0.45 μm 100/pk
色譜柱及保護柱
82001	極性改性通用型反相色譜柱 Spursil C18	150 × 4.6 mm，5 μm
6221	EasyGuard保護柱柱套	適合 10 mm 柱芯，1/pk
6803	Spursil C18保護柱柱芯	5 μm, 10 x 4.0 mm 2/pk
標準品
12-N-12303-2G	乳酸[50-21-5]	2 g
12-N-11011-10G	乙酸[64-19-7]	10 g
12-N-13115-10G	丙酸[79-09-4]	10 g
12-N-11388-10G	丁酸[107-92-6]	10 g
HPLC溶劑Ÿ緩沖鹽Ÿ離子對試劑
50102	甲醇 HPLC級	4 L
50159	磷酸二氫鉀, 無(wú)水 HPLC級	100 g
50133	磷酸 HPLC級	50 mL
通用色譜產(chǎn)品
52401B	瓶架/藍色	50 孔
52401A	瓶架/白色	50孔
5323	樣品瓶（棕色/螺紋）	2 mL, 100/pk
5325	樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝）	100/pk
H80465	HPLC 進(jìn)樣針	25 μL

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