在液相色譜柱的使用中，我們會(huì )發(fā)現很多實(shí)驗室會(huì )面臨色譜柱頻繁損壞的問(wèn)題。
首先，需要來(lái)了解一下色譜柱的損壞來(lái)源于哪些方面：
泵頭密封圈的磨損
進(jìn)樣閥轉子密封圈的磨損
析出的緩沖鹽
樣品中的復雜易吸附基質(zhì)
其實(shí)，在工作過(guò)程中大多數的顆粒物堵塞導致的色譜柱背壓升高問(wèn)題是體現在柱頭堵塞。
而樣品的易吸附機制也可能會(huì )和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導致色譜柱背壓升高。
但是這種情況在較低的PH系統中會(huì )有所改善，因為較低的PH系統會(huì )降低硅膠表面的硅醇基發(fā)生解離。
預防措施
1在液相系統中加入在線(xiàn)過(guò)濾器
在線(xiàn)過(guò)濾器的內部顆?？障兑话闶?.5微米，對于UHPLC會(huì )選擇0.2微米空隙的在線(xiàn)過(guò)濾器。這個(gè)空隙尺寸和柱頭的過(guò)濾篩板尺寸接近或者略小。
所以，在線(xiàn)過(guò)濾器能夠有效的阻隔來(lái)自樣品、泵頭密封墊、自動(dòng)進(jìn)樣器的轉子密封墊的顆粒物，以防止柱頭過(guò)濾篩板的堵塞。
注意：但是對于非常低死體積的液相系統，在線(xiàn)過(guò)濾器的加入可能會(huì )導致系統死體積增大峰展寬變嚴重的問(wèn)題。而對于大多數的液相系統而言，色譜圖不會(huì )有太大變化。
2在柱子前端使用保護柱
保護柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實(shí)是一個(gè)和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。
因為它具有和分析柱相同的內部填料，所以保護柱不僅可以阻隔顆粒物，還可以阻隔易吸附的樣品基質(zhì)組分。
注意：由于保護柱中可能有大量的強保留組分，在用強溶劑清洗系統時(shí)請取下保護柱，以防止這些強保留組分被洗脫進(jìn)分析柱。保護柱如果出現吸附飽和也可能會(huì )對分離效果有影響
3對樣品進(jìn)行凈化處理
有一些液相的分析方法沒(méi)有明確標注樣品的凈化，但我希望大家在做分析時(shí)都能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對樣品進(jìn)行過(guò)濾。
在實(shí)際工作中，色譜柱的儲存也會(huì )影響柱子的使用壽命。那么對于色譜柱的儲存，也有以下建議：
短期儲存時(shí)
應該保存在接近常用的流動(dòng)相條件下。并且，一定要移除系統中的緩沖鹽、酸等。
長(cháng)期儲存時(shí)
將色譜柱按照說(shuō)明書(shū)的要求保存在對應的溶劑中，并且將色譜柱從系統中取下兩頭用堵頭堵死。
網(wǎng)站首頁(yè) ◇ 技術(shù)支持 ◇ 如何避免液相色譜柱的損壞呢
