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通用型反相液相色譜柱在使用緩沖液的過(guò)程中要注意這幾點(diǎn)
  • 更新日期:2019-06-26     信息來(lái)源:本站      瀏覽次數:2120
    • 通用型反相液相色譜柱優(yōu)點(diǎn)是固定相穩定,應用廣泛,可使用多種溶劑。但硅膠為基質(zhì)的填料,使用時(shí)一定要注意流動(dòng)相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8,流動(dòng)相的PH值小于2時(shí),會(huì )導致鍵合相的水解;當PH值大于7時(shí)硅膠易溶解;經(jīng)常使用緩沖液固定相要降解。

       
      通用型反相液相色譜柱在使用前,要進(jìn)行柱的性能測試,并將結果保存起來(lái),作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照色譜柱出廠(chǎng)報告中的條件進(jìn)行(出廠(chǎng)測試所使用的條件是較佳條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。
       
      通用型反相液相色譜柱在使用緩沖液的過(guò)程中還要注意以下幾點(diǎn):
        a.避免使用鹽酸鹽,鹽酸鹽對鋼質(zhì)有腐蝕作用;
        b.緩沖液要現配現用,往往緩沖液是良好的菌類(lèi)培養液,隔天或放置長(cháng)時(shí)間實(shí)驗時(shí)會(huì )發(fā)生很多怪現象;
        c.使用緩沖液要及時(shí)掌握pH范圍,做到胸中有數;
        d.清洗液路和柱子時(shí),有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗;
        e.長(cháng)時(shí)間用緩沖溶液要注意觀(guān)察接頭處有無(wú)析出,若有白色鹽類(lèi)析出,定期用10%硝酸沖洗液路(拆下柱子,沖洗30mL10%硝酸溶液,再用5倍水沖洗)可以避免液路的堵塞;
        f.選擇緩沖液要用可靠的試劑,避免不純的鹽類(lèi)造成不必要的麻煩;
        過(guò)渡流動(dòng)相是指有機相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同,但是不含緩沖鹽的溶液。

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